本公司所有产品仅供实验室科学研究使用,不得用于医疗诊断,食品,化妆品和其他用途。
具体价格说明书,请联系客服索取!
检测原理:
试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。
试剂盒组成:
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组织样本处理 (动物组织,肌肉 肝脏 肾脏 大便 植物组织等)
(组织匀浆的制备参考:
1、取组织块(0.1g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆。
① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),镜检观察:
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.
二、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。)
细胞样本:a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
代测服务:
凡是购买我司科研检测试剂盒产品,提供免费待测服务。【客户提供】
寄标本时需注明以下情况:
1 、标本编号; 2 、所测项目; 3 、是否做复孔; 3 、联系方式; 4 、实验后标本是否寄回。
实验要求,实验标本包括:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
样本注意事项:
客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用。
对因特殊原因需要周期收集的标本,需将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存,并避免反复冻融。
标本2-8 ℃可保存48小时,-20 ℃可保存1个月。-70 ℃可保存6个月
常见问题解答:
1.客户:试剂盒规格有哪些?
客服1:试剂盒分48t和96t两种规格。
2.客户:每盒试剂盒可以测多少样本?
客服1:48t测41个样,96t可以测89个样。
3.客户:试剂盒可以用于临床吗?
客服1:我们所提供的一切产品都是科研试剂盒,仅供科学研究,严禁用于医学诊断。
4.试剂盒保质期多久?
客服1:保质期6个月,都是当月批次。
5.试剂盒怎么保存运输?
客服1:2-8℃,避光防潮保存。运输泡沫盒加生物冰袋的。
具体咨询客服,索取详细试剂盒说明书!
免责声明:
1.以上说明为模板发布仅供参考,具体说明书可以联系客服索取。试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
具体价格说明书,请联系客服索取!
检测原理:
试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。
试剂盒组成:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组织样本处理 (动物组织,肌肉 肝脏 肾脏 大便 植物组织等)
(组织匀浆的制备参考:
1、取组织块(0.1g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆。
① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),镜检观察:
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机3000转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.
二、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。)
细胞样本:a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
代测服务:
凡是购买我司科研检测试剂盒产品,提供免费待测服务。【客户提供】
寄标本时需注明以下情况:
1 、标本编号; 2 、所测项目; 3 、是否做复孔; 3 、联系方式; 4 、实验后标本是否寄回。
实验要求,实验标本包括:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
样本注意事项:
客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用。
对因特殊原因需要周期收集的标本,需将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存,并避免反复冻融。
标本2-8 ℃可保存48小时,-20 ℃可保存1个月。-70 ℃可保存6个月
常见问题解答:
1.客户:试剂盒规格有哪些?
客服1:试剂盒分48t和96t两种规格。
2.客户:每盒试剂盒可以测多少样本?
客服1:48t测41个样,96t可以测89个样。
3.客户:试剂盒可以用于临床吗?
客服1:我们所提供的一切产品都是科研试剂盒,仅供科学研究,严禁用于医学诊断。
4.试剂盒保质期多久?
客服1:保质期6个月,都是当月批次。
5.试剂盒怎么保存运输?
客服1:2-8℃,避光防潮保存。运输泡沫盒加生物冰袋的。
具体咨询客服,索取详细试剂盒说明书!
免责声明:
1.以上说明为模板发布仅供参考,具体说明书可以联系客服索取。试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。