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赫澎(上海)生物科技有限公司
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神经组织髓鞘(myelin sheath)固蓝(FAST BLUE)染色试剂盒
产品编号 HPBIO-JM4630
中文名称: 神经组织髓鞘(myelin sheath)固蓝(FAST BLUE)染色试剂盒
英文名称:
品牌: 赫澎生物HEPENGBIO
规格型号: 50次
髓鞘是白色脂肪、无生命的物质存在于神经纤维周围形成一个绝缘和保护作用的鞘。腊克沙固蓝(Luxol fast blue),又称罗克沙尔坚牢蓝或溶剂蓝38,深蓝青色粉末。系一种酞菁铜的磺酸二芳基胍盐(diarylquanidine salt of a sulphonated copper phthalocyanine)。通过酸碱反应形成盐的过程,由脂蛋白的碱性成分取代染料的碱性成分,达到染色的目的,特异性地针对含有磷脂的髓鞘质。
 
产品内容
 
HEPENGBIO脱蜡液(Reagent A)         毫升(自备)
HEPENGBIO补水液A(Reagent B)  毫升
HEPENGBIO补水液B(Reagent C)  毫升
HEPENGBIO补水液C(Reagent D)  毫升
HEPENGBIO补水液D(Reagent E)  毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent F)  毫升
HEPENGBIO平衡液(Reagent G)  毫升
产品说明书  1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里,避免光照,瓶口密闭;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月
 
用户自备
 
小型玻璃染色缸:用于石蜡切片的脱蜡和染色操作
培养箱:用于切片染色孵育
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
 
 
 
 
实验步骤
 
一、 脱蜡处理
 
1. 取出10片待测的10微米厚的石蜡包埋的组织切片(注意:石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,此步很重要
2. (选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3. (选择步骤)室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
染色缸  孵育时间 
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液Reagent A  15分钟
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液Reagent A 15分钟
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液Reagent A 15分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液AReagent B 3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液BReagent C 3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液CReagent D 3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液DReagent E  3分钟
 
5. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液DReagent E
6. 小心加上xx微升HEPENGBIO补水液AReagent B在切片上,铺满整个切片样品表面
7. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液AReagent B
二、 样本染色处理
1. 准备1个50或100毫升小型染色缸
2. 加入适量的HEPENGBIO染色液(Reagent F到小型染色缸里
3. 小心放进上述脱蜡处理的切片(注意:确保切片浸泡在HEPENGBIO染色液(Reagent F
4. 置于60℃培养箱里孵育16小时,避免光照(注意:参见注意事项89
5. 取出切片,小心移去切片上的HEPENGBIO染色液(Reagent F
6. 室温下,小心将切片置入新的xx毫升HEPENGBIO补水液AReagent B中5次(2秒/次) 
7. 轻轻移去切片上的HEPENGBIO补水液AReagent B),或空气中晾干 
8. 小心加上xx微升HEPENGBIO补水液DReagent E
9. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液DReagent E
10. 小心加上xx微升HEPENGBIO平衡液(Reagent G
11. 室温下孵育30秒
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO平衡液(Reagent G
13. 小心加上xx微升HEPENGBIO补水液BReagent C
14. 室温下孵育30秒
15. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液BReagent C
16. 小心加上xx微升HEPENGBIO补水液DReagent E
17. 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液DReagent E
18. 重复实验步骤13至17,直至可见蓝色(白质)和灰色(灰质)的对比差异
19. (选择步骤)进行复染操作(建议使用HEPENGBIO甲苯酚紫(CRESYL VIOLET)复染试剂盒-HEPENGBIO80052)
20. 放上盖玻片或封片(中性树脂)
21. 即刻在一般光学显微镜下观察:
神经髓鞘质或髓鞘质包裹的神经纤维呈现蓝色/绿色,
如果复染,神经元呈现粉红色或紫色
 
注意事项
 
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
4. 建议使用玻璃染色缸
5. 石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,否则造成样品支离破碎
6. 每次更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干
7. 试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面
8. HEPENGBIO染色液(Reagent F)避免光照
9. 染色时,染色缸须密闭,至关重要
10. 染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 
11. 样品染色后保存,避免光照
12. 本公司提供系列组织细胞神经系统成分染色试剂产品
检测报告(COA)
使用说明
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