作为细胞染色剂之一的二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝（3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide；MTT），简称噻唑盐染料，可以自由地进入活细胞中。细胞繁殖快，其代谢旺盛，线粒体琥珀酸脱氢酶的活性增强，从而还原细胞浆中的淡黄色外源性染料为不溶性、蓝紫色结晶产物而留存在细胞内，使用特定有机化物质溶解结晶颗粒而呈现出颜色深浅，在570nm波长下产生吸收峰：吸光值与细胞量成线性正相关，反映细胞活力。
 
产品内容
 
HEPENGBIO染色液（Reagent A）    毫升
HEPENGBIO溶解液（Reagent B）    毫升
产品说明书                        1份
 
保存方式
 
保存在－20℃冰箱里，避免光照，有效保证6月
 
用户自备
 
酶标仪：用于定量检测染色细胞
移液排枪：用于同步加入染色试剂
 
实验步骤
 
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒放在室温下融化,置于暗室里。然后进行下列操作。
 
一、贴壁细胞检测
1． 从细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板
2． 确保96孔板中每一个孔含有100微升细胞培养液
3． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent A）到96孔板中每一个孔里
4． 放进37℃培养箱里，孵育2小时（可见紫色结晶沉淀）
5． 小心抽去每孔中含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）的培养液（注意：确保培养孔中无任何液体残留）
6． 小心加入xx微升HEPENGBIO溶解液（Reagent B）到96孔板中每一个孔里
7． 放进37℃培养箱里，孵育20分钟
8． 轻轻摇动96孔板，使其混匀
9． 即刻放进酶标仪测读：波长570nm
10． 绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为吸光值（OD）；横坐标（X轴）为细胞数
 
一、 悬浮细胞检测
1． 从细胞培养箱里取出待测的96孔细胞培养板
2． 确保96孔板中每一个孔含有100微升细胞培养液
3． 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent A）到96孔板中每一个孔里
4． 放进37℃培养箱里，孵育4小时（可见紫色结晶沉淀）
5． 放进孔板离心机离心10分钟，速度为300g
6． 小心抽去每孔中含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）的培养液（注意：确保培养孔中无任何液体残留）
7． 小心加入xx微升HEPENGBIO溶解液（Reagent B）到96孔板中每一个孔里
8． 放进37℃培养箱里，孵育1小时
9． 轻轻摇动96孔板，使其混匀
10． 即刻放进酶标仪测读：波长570nm
11． 绘制细胞生长曲线：纵座标（Y轴）为吸光值（OD）；横坐标（X轴）为细胞数