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HEPENGBIO植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量检测试剂盒
产品说明书
主要用途
HEPENGBIO植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合反应系统中释放出巯基辅酶A,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定植物裂解样品中酶活性的方法。其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等查尔酮合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
查尔酮合成酶(chalcone synthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮体合成酶(polyketide synthase;PKS)大家属中的一员,是启动类黄酮(flavonoid)化合物合成通路中第一步关键酶,形成植物系统性获得性抗性(systematic acquired resistance;SAR)的基础。查尔酮合成酶存在于细菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各种不同发育阶段中的不同组织中表达。查尔酮合成酶为同源二聚体,分子量为40至4000Kd,由环境压力,包括UV照射、伤口、病原菌袭击等诱导,通过丙二酰辅酶A脱羧基反应(decarboxylation)、与香豆酰辅酶缩合、聚酮体链延展(chain elongation)、中间产物环状化(cyclization)和芳构化(aromatization)产生查尔酮,一种类黄酮化合物前体,作为化学信使,由此生成各种后续继发性代谢化合物,参与抗病原微生物例如异黄酮植物保护素(isoflavonoid phytoalexin)、花青素花色素化、抵御环境压力(UV光保护)、花粉育性(pollen fertility)、抗氧化、共生根系结瘤(symbiotic root nodulation),以及作为抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤和抗真菌的药物作用。还在细菌的囊肿形成和阿米巴细胞分化中产生作用。基于香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A,在敏感性抑制剂木犀草素(Luteolin)存在与否的情况下,受到查尔酮合成酶的作用,缩合产生查尔酮,并释放出巯基辅酶A(CoA-SH),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析查尔酮合成酶的活性。查尔酮合成酶反应系统为:
chalcone synthase
4-Coumaroyl CoA + 3 malonyl CoA → naringenin chalcone + 4 CoA-SH + 3CO2
DTNB + CoA-SH → TNB + CoA-S-S-TNB
产品内容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 60毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B) 20毫升
HEPENGBIO缓冲液(Reagent C) 12毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent D) 1毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent E) 1.5毫升
HEPENGBIO专性液(Reagent F) 400微升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO缓冲液(Reagent C)、HEPENGBIO反应液(Reagent D)和HEPENGBIO底物液(Reagent E)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反应液(Reagent D)和HEPENGBIO底物液(Reagent E)避免光照;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器
DOUNCE匀浆器:用于裂解组织细胞
微型台式离心机:用于样品操作
200微升1厘米光径比色皿或96孔板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析
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HEPENGBIO植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量检测试剂盒
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技术背景
查尔酮合成酶(chalcone synthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮体合成酶(polyketide synthase;PKS)大家属中的一员,是启动类黄酮(flavonoid)化合物合成通路中第一步关键酶,形成植物系统性获得性抗性(systematic acquired resistance;SAR)的基础。查尔酮合成酶存在于细菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各种不同发育阶段中的不同组织中表达。查尔酮合成酶为同源二聚体,分子量为40至4000Kd,由环境压力,包括UV照射、伤口、病原菌袭击等诱导,通过丙二酰辅酶A脱羧基反应(decarboxylation)、与香豆酰辅酶缩合、聚酮体链延展(chain elongation)、中间产物环状化(cyclization)和芳构化(aromatization)产生查尔酮,一种类黄酮化合物前体,作为化学信使,由此生成各种后续继发性代谢化合物,参与抗病原微生物例如异黄酮植物保护素(isoflavonoid phytoalexin)、花青素花色素化、抵御环境压力(UV光保护)、花粉育性(pollen fertility)、抗氧化、共生根系结瘤(symbiotic root nodulation),以及作为抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤和抗真菌的药物作用。还在细菌的囊肿形成和阿米巴细胞分化中产生作用。基于香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A,在敏感性抑制剂木犀草素(Luteolin)存在与否的情况下,受到查尔酮合成酶的作用,缩合产生查尔酮,并释放出巯基辅酶A(CoA-SH),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析查尔酮合成酶的活性。查尔酮合成酶反应系统为:
chalcone synthase
4-Coumaroyl CoA + 3 malonyl CoA → naringenin chalcone + 4 CoA-SH + 3CO2
DTNB + CoA-SH → TNB + CoA-S-S-TNB
产品内容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 60毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B) 20毫升
HEPENGBIO缓冲液(Reagent C) 12毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent D) 1毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent E) 1.5毫升
HEPENGBIO专性液(Reagent F) 400微升
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用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
15毫升锥形离心管:用于样品制备的容器
DOUNCE匀浆器:用于裂解组织细胞
微型台式离心机:用于样品操作
200微升1厘米光径比色皿或96孔板:用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪:用于比色分析