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HEPENGBIO细胞总胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
HEPENGBIO细胞总胆固醇酶连续循环比色法定量检测试剂是一种旨在通过胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和过氧化酶的酶连续反应系统中产生的过氧化氢（H2O2），与氨基安替比林反应，生成粉红色的醌亚胺后吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中总胆固醇浓度的方法。其适用于各种细胞（动物、人体等）裂解萃取样品中总胆固醇、游离胆固醇、结合胆固醇的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景
胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和酯化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物体内，主要以游离形式循环于血液中，以脂化形式传运和贮存。胆固醇在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用，与肝脏疾病、甲状腺疾病、动脉硬化和心脏疾病密切相关。酯化胆固醇（cholesterel ester）在胆固醇酯酶（cholesterol esterase）的水解下，转化为游离胆固醇，进一步由胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase）氧化产生过氧化氢（H2O2）。在过氧化酶（peroxidase）的催化下，过氧化氢与氨基安替比林（4-amino-antipyrine；AAP）反应，生成粉红色的醌亚胺（quinoneimine）后吸光峰值的变化（波长500nm），来定量测定总胆固醇的浓度。其酶连续反应系统为：
cholesterol esterase
cholesterol esters       →    cholesterol  +  free fatty acids
cholesterol oxidase
  cholesterol  +  O2   →    ketone  +  H2O2
peroxidase
AAP  +  phenol  +  2H2O2     →    quinoneimine   +  4H2O 
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A）         120毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent B）     5毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C）     10毫升
HEPENGBIO反应液A（Reagent D）     250微升
HEPENGBIO反应液B（Reagent E）     250微升
HEPENGBIO底物液（Reagent F）     500微升
HEPENGBIO标准液（Reagent G）     200微升
产品说明书      1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；HEPENGBIO底物液（Reagent F）和HEPENGBIO标准液（Reagent G）避免光照；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于标准样品配制的容器
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离
微型台式离心机：用于样品制备
烘箱：用于样品萃取的孵育
恒温水槽或培养箱：用于孵育反应
平式摇荡仪：用于反应物混匀
比色皿或96孔板：用于反应和比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色分析