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主要用途
HEPENGBIO细胞沉默调节蛋白3 （SIRT3）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针氨甲基香豆素标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT3脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放释放出具有强烈荧光的7-氨-4甲基香豆素，即采用荧光法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的方法。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、线粒体蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT3的活性定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
人体组蛋白脱乙酰基酶（histone deacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（class I）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（class II）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatin A；TSA）敏感。种类III（class III）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（Silent Information Regulator 2）同源，是进化保留的古老的酶类，存在于真核生物、古生菌（Archaea）和真细菌（Eubacteria）等，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatin A；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。其中可溶性SIRT3位于细胞线粒体内，体内热量限制（caloric restriction）、寒冷刺激、细胞应激等因素，使成熟且活性Sirt3由细胞核转移到线粒体，经基质加工肽酶（matrix-processing peptidase）激活，表达增加，作用于乙酰辅酶A合酶2（acetyl CoA synthetase 2）、UCP1、PGC-1α等天然目标底物，脱乙酰化和激活。其功能在于调节适应性生热反应（thermogenesis）、确保能量产生、提供乙酸的代谢使用、调节基础ATP水平、调节影响线粒体通透性的凋亡信号、调节表观遗传基因沉默，是代谢或氧化状态的感应因子，生命延长（life extension）的标志。Sirt3异常，将导致神经退行性疾病、癌症、衰老、代谢功能异常等疾病。基于人工合成的乙酰化p53多肽底物Ac- Gln-Pro -Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用荧光染料氨甲基香豆素（aminomethylcoumarin；AMC）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，最后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈荧光的7-氨-4甲基香豆素（7-amino-4-methylcoumarin；AMC）（激发波长350-360nm；散发波长450-465nm），由此来定量测定沉默调节蛋白3的活性。其反应系统为：
Sirt3
Ac-Gln-Pro-Lys-Lys（Ac）-AMC + NAD → Ac- Gln-Pro -Lys-Lys-AMC + nicotinamide + O-acetyl-ADP-ribose
氨基肽酶
Ac-Arg-His-Lys-Lys-AMC → Ac-Arg—His-Lys-Lys + AMC
本公司所有产品仅供实验室科学研究使用，不得用于医疗诊断，食品，化妆品和其他用途。
产品信息价格说明书等相关资料，可以联系客服咨询索取。
HEPENGBIO细胞沉默调节蛋白3 （SIRT3）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针氨甲基香豆素标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT3脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放释放出具有强烈荧光的7-氨-4甲基香豆素，即采用荧光法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的方法。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、线粒体蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT3的活性定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
人体组蛋白脱乙酰基酶（histone deacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（class I）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（class II）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatin A；TSA）敏感。种类III（class III）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（Silent Information Regulator 2）同源，是进化保留的古老的酶类，存在于真核生物、古生菌（Archaea）和真细菌（Eubacteria）等，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatin A；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。其中可溶性SIRT3位于细胞线粒体内，体内热量限制（caloric restriction）、寒冷刺激、细胞应激等因素，使成熟且活性Sirt3由细胞核转移到线粒体，经基质加工肽酶（matrix-processing peptidase）激活，表达增加，作用于乙酰辅酶A合酶2（acetyl CoA synthetase 2）、UCP1、PGC-1α等天然目标底物，脱乙酰化和激活。其功能在于调节适应性生热反应（thermogenesis）、确保能量产生、提供乙酸的代谢使用、调节基础ATP水平、调节影响线粒体通透性的凋亡信号、调节表观遗传基因沉默，是代谢或氧化状态的感应因子，生命延长（life extension）的标志。Sirt3异常，将导致神经退行性疾病、癌症、衰老、代谢功能异常等疾病。基于人工合成的乙酰化p53多肽底物Ac- Gln-Pro -Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用荧光染料氨甲基香豆素（aminomethylcoumarin；AMC）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，最后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈荧光的7-氨-4甲基香豆素（7-amino-4-methylcoumarin；AMC）（激发波长350-360nm；散发波长450-465nm），由此来定量测定沉默调节蛋白3的活性。其反应系统为：
Sirt3
Ac-Gln-Pro-Lys-Lys（Ac）-AMC + NAD → Ac- Gln-Pro -Lys-Lys-AMC + nicotinamide + O-acetyl-ADP-ribose
氨基肽酶
Ac-Arg-His-Lys-Lys-AMC → Ac-Arg—His-Lys-Lys + AMC
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